Bence-Jones proteīns

Vesela cilvēka urīns nesatur Bence-Jonesa olbaltumvielu, ko attēlo imūnglobulīnu vieglās ķēdes, kas tiek konstatētas ļaundabīgo audzēju procesu veidošanās rezultātā.

Lai diagnosticētu vairākus patoloģiskus traucējumus (biežāk imunitātes β-sistēmas problēmas), kā arī lai noteiktu izmantotās terapijas efektivitāti, ir vajadzīgi laboratoriski pētījumi par konkrētu zemu molekulāro olbaltumvielu klātbūtni.

Pārmērīgā daudzumā Bens-Jonesa proteīnu ražo plazmas šūnas, pārvietojas ar asinsriti un izdalās ar urinēšanu. Tas ir pēdējais olbaltumvielu struktūras īpašums, kas ļauj urīnā pārbaudīt šādas slimības:

• mieloma;
• osteosarkomu;
• plasmacytus;
• limfocītu leikēmija hroniskā stadijā;
• limfogranulematozes;
• primārā tipa amiloidoze;
• makroglobulinēmija;
• idiopātiskās skābes monoklonālā gammopātija.

Klīniski apstiprināta saistību starp specifiska proteīna izolēšanu un sekojošu nieru darbības traucējumu, ko izraisa toksisku ietekmi olbaltumvielu uz epitēlija nieru kanāliņu struktūras, kas savukārt izraisa parādība distrofija, Fankoni sindroms, nieru amiloidozes.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9]

Bens-Jonesa proteīns urīnā

Olbaltumvielu klātbūtne urīnā tiek saukta par proteinūriju. Ar prerenālu proteinūriju saprot daudzu zemu molekulāro olbaltumvielu saturu urīnā. Tajā pašā laikā nieru filtram un kanāliņiem nav bojājumu, un normālā nieru darbība nespēj nodrošināt proteīnu struktūras reabsorbciju. Ekstrakorporāla (false) proteīnūrija, t.i. Kas turpinās bez nieru funkcijas traucējumiem, norāda uz infekcijas vai ļaundabīgas procesa klātbūtni organismā. Proteīnūrija tiek novērota 60-90% pacientu ar mielomu. Aptuveni 20% no patoloģiskajiem stāvokļiem rodas Bentona-Jonesa mielomai.

Bens-Jonesa olbaltumviela urīnā ir diferencēta imunitātes β-sistēmas humorālās maiņas dēļ. Olbaltumvielu, kas saistīti ar patoloģiju multiplās mielomas, paraproteinemic ļaundabīgas hematoloģiskas slimības, endotheliosis, Valdenstrēma makroglobulinēmijas, limfātiskās leikēmijas, osteosarkomas rašanos. Bens-Jonesa proteīna identificēšana urīnā ir svarīgs diagnostikas un prognostiskais posms. Bence Jones proteīns ir saistīts ar zemu molekulmasu, tika izdalīta ar urīnu, nieru kanāliņu epitēlijs bojāšanu, riskējot nieru mazspējas attīstību, kas var novest līdz nāvi. Svarīgi ir arī savlaicīga olbaltumvielu klasifikācija atbilstoši tipam: λ-proteīnam ir lielāka nefrotoksiska iedarbība nekā κ.

[10], [11], [12], [13], [14]

Bens-Jones proteīna analīze

Blakusparādību klātbūtne, kas nav serums urīnā, norāda uz limfas leikēmiju, osteosarkomu vai mielomu (kaulu smadzeņu audzēja procesi). Bence-Jonesa proteīns, kad urīna filtrāts tiek uzkarsēts līdz 45-60 ° C temperatūrai, nokļūst mākoņainā nogulšņu veidā, kas nosēdās uz caurules sieniņām. Turpmāka temperatūras paaugstināšanās līdz viršanas temperatūrai izšķīdina izolēto duļķainību.

Bens-Jonesa proteīna kvantitatīvā analīze ir šāda:

• ūdens daļas un slāpekļskābes daļas kā reaģenta izmantošana;
• Izvietojums slāpekļskābes mēģenē (0,5-1 ml) ar pētāmā urīna līmeņa vienādošanu;
• Rezultāta novērtējums pēc 2 minūtēm (plānā gredzena izskats pie šķidrā medus robežām norāda uz 0,033% proteīnu struktūras klātbūtni).

Novērošana no šķiedrveida gredzenu prasa urīna atšķaidījumu ar ūdeni proporcijā 1: 1, izskats minētā biezs gredzens daļa no vajadzību samaisa urīnu ar trim daļām ūdens, un gadījumā kompaktu gredzens porcijas urīna atšķaidītu septiņas porcijas ūdens. Un audzēšana tiek turpināta, kamēr raksturīgais nogulsnes izpaužas 2-3 minūšu testā.

Sastāvā esošo olbaltumvielu daudzumu aprēķina, reizinot 0,033% ar atšķaidīšanas daudzumu. Piemēram, urīns tika atšķaidīts 10 reizes, proteīna ķēžu gredzens parādījās pētījuma 3. Minūtes beigās, pēc tam olbaltumvielu iekļaušanas procentos aprēķināja šādi: 0,033x10 = 0,33.

Ja nav nokrišņu, novērtējiet duļķainības pakāpi - izteikti, vāji vai tikko pamanāmi duļķainības pēdas.

[15], [16], [17], [18], [19],

Bence-Jonesa proteīna sekrēcija

Pēc izdalītā imūnglobulīna veida atšķiras:

• vieglo ķēžu patoloģija (Bence-Jonesa proteīna sekrēcija);
• glomerulopātija (citu imūnglobulīnu sekrēcija).

Pastāv arī dažādas nieru bojājumu kombinācijas. Kā pierāda prakse, nefropātija ir limfoproliferatīvās patoloģijas (multiplās mielomas, hroniskas limfoleikozes, Waldenstrom slimības utt.) Sekas.

Izolējot asinsritē, tāpat kā visus olbaltumvielas ar masu līdz 40 kDa molekulām, gaismas ķēdes iziet caur nieres filtru, pēc tam lizosomas sadalās oligopeptīdos un aminoskābēs. Vieglu ķēžu pārākums izraisa katabolitātes reakcijas disfunkciju un iespējamo lizosomu fermentu izdalīšanu, kas izraisa caurejas audu nekrozi. Olbaltumvielas izraisa nespēju reabsorbēt un, ja monoklonālās vieglās ķēdes ir savienotas ar Tamm-Horsfall olbaltumvielu, proteīnu cilindri veido distālās kanāliņās.

Bence-Jones proteīns mielomas gadījumā

Ar multiplu mielomu saprot patoloģisku stāvokli, kad ķermenis aizvieto pilnvērtīgus plaušas ar vieglām imūnglobulīna ķēdēm. Slimības diagnosticēšana un stāvokļa kontrole tiek veikta ar urīna laboratorijas pārbaudi, parādot olbaltumvielu struktūras kvantitatīvo saturu. Mielomas apakštipa specifiskums ir balstīts uz seruma analīzi. Šīs slimības klīniskās pazīmes ir: sāpīgs kaulu sindroms, urinācijas disfunkcija, nezināmas izcelsmes hematomas, šķidruma aizturi organismā.

Bence Jones proteīns multiplās mielomas nosaka, izmantojot standarta pārbaudi, norādot kvantitatīvo saturu proteīnu struktūru un cik lielā mērā ir nieru bojājuma. Identifikācija olbaltumvielu urīnā paskaidro epitēlija bojājumus ar sklerozes nieru stroma, beidzot veido nieru mazspēja - cēlonis mirstības kas izriet no mielomas bojājumiem (Bence-Jones proteīns pilnīgi nosprosto kanālos, novēršot urīnu).

Statistika liecina, ka mieloma atšķiras vīriešiem vecākiem par 60 gadiem, kam anamnēzē ir ģenētiska predispozīcija, aptaukošanās un imūnsupresija, un kuri ir pakļauti toksiskām un radioaktīvām vielām.

[20], [21], [22], [23], [24],

Bence-Jonesa proteīna noteikšana

Lai diferencētu specifisku olbaltumvielu, tiek veikts laboratorijas pētījums par vidējās rīta urīna daļu (nepieciešamais tilpums ir vismaz 50 ml). Bence-Jonesa proteīna klātbūtne, nosakot kvantitatīvo komponentu, ir iespējama imūnfiksācijas metodi. Olbaltumvielu atdalīšana notiek, izmantojot elektroforēzi, kam seko imunofikācija, izmantojot īpašus serumus. Saistojot olbaltumvielu ar plaušu un imūnglobulīnu smago ķēžu antivielām, tiek veidoti imūnsistēmas, kas tiek novērtētas krāsošanas procesā.

Jāatzīmē, ka pat minimālā olbaltumvielu koncentrācija tiek konstatēta, pateicoties reakcijai uz kalcija sulfosalicilu. Bens-Jonesa olbaltumvielu nosaka, apvienojot filtrēto urīnu (4 ml) ar acetāta buferšķīdumu (1 ml). Turpmāka sildīšana līdz 60 ° C ūdens vannā un 15 minūšu turēšana ar pozitīvu paraugu dod raksturīgas nogulsnes. Šo tehniku uzskata par visuzticamāko. Negatīvi ietekmējot analīzes rezultātus var būt pārāk skāba vai sārmaina vide un zems relatīvais blīvums urīnā.

Pētījuma metodes, kurās Bens-Jonesa olbaltumviela izšķīst, apkuriņojot līdz 100 ° C vai atdzesējot atkal nogulsnējas, nav ticami, jo ne visiem proteīnu elementiem ir atbilstošas īpašības. Bet indikatora papīra lietošana nav absolūti piemērota Bence-Jones proteīna noteikšanai.

[25], [26], [27], [28], [29], [30]