Raksta medicīnas eksperts
Jaunas publikācijas
Polimerāzes ķēdes reakcija (PCR) infekcijas slimību diagnostikā
Pēdējā pārskatīšana: 23.04.2024
Visi iLive saturs ir medicīniski pārskatīts vai pārbaudīts, lai nodrošinātu pēc iespējas lielāku faktisko precizitāti.
Mums ir stingras iegādes vadlīnijas un tikai saikne ar cienījamiem mediju portāliem, akadēmiskām pētniecības iestādēm un, ja vien iespējams, medicīniski salīdzinošiem pārskatiem. Ņemiet vērā, ka iekavās ([1], [2] uc) esošie numuri ir klikšķi uz šīm studijām.
Ja uzskatāt, ka kāds no mūsu saturiem ir neprecīzs, novecojis vai citādi apšaubāms, lūdzu, atlasiet to un nospiediet Ctrl + Enter.
PCR - viens no metodēm DNS diagnostikai, kas ļauj palielināt kopiju skaitu nosakāmā daļu genoma (DNS), baktēriju vai vīrusu ir miljons reižu, izmantojot DNS polimerāzes fermentu. Tests, lai šajā konkrētajā genoma Nukleīnskābe segmentā atkārtoti reizināta (papildināts), kas nodrošina tā identifikāciju. First, DNS molekula no baktēriju vai vīrusu karsējot sadalīta divās ķēdēs, tad klātbūtnē sintezēto DNS praimeriem (secība ir īpaši definētajai genoma nukleotīdu) ir saistošs tos ar papildu posmos DNS, sintezēts otro aspektu nukleīnskābes pēc katras gruntēšanas klātbūtnē Thermostable DNS polimerāze . Izrādās divas DNS molekulas. Process tiek atkārtots vairākas reizes. Diagnostikai, tikai viens DNS molekula, t.i., baktērija vai vīruss daļiņu. Pakļaušanu reakcijai papildu soli - DNS sintēze uz RNS molekulas, izmantojot fermentu reversās transkriptāzes - ir atļauts pārbaudīt RNS vīrusu, piemēram, HCV vīrusu. PCR - trīspakāpju process, atkārtotus cikli denaturation, rūdīšana praimeru, DNS sintēze (polimerizācija). Ar DNS summa sintezēts tika identificēts ar ELISA un elektroforēzes.
PCR var tikt izmantoti dažādās bioloģiskā materiāla - serumu vai asins plazma, izgriezumus no urīnizvadkanāla, biopsijas, pleiras šķidrumā, cerebrospinālais šķidrums utt Kur pirmā PCR tika diagnosticēšanai izmanto infekcijas slimību, piemēram, vīrusu hepatīta B, C vīrusa hepatīta, vīrusu D hepatīta, CMV infekcija, infekcijas seksuāli transmisīva infekcija (gonoreja, trash diynaya, mikoplazmu, Ureaplasma infekcija), tuberkuloze, HIV -infektsiya uc
PCR priekšrocība infekcijas slimību diagnozē salīdzinājumā ar citām pētījumu metodēm ir šāda:
- infekcijas izraisītājs var būt jebkurā ķermeņa bioloģiskajā vidē, tostarp materiālā, kas iegūts biopsijā;
- Ir iespējams diagnosticēt infekcijas slimības agrākajā slimības stadijā;
- Iespējams veikt pētījuma rezultātu kvantitatīvu novērtējumu (cik vīrusu vai baktēriju atrodas izmeklējamajā materiālā);
- liela metodes jutība; piemēram, jutība PCR izmantota, lai noteiktu DNS B hepatīta vīrusa asinīs ir 0,001 pg / ml (aptuveni 4 x 10 2 kopijas / ml), bet jutība DNS hibridizācijas metodi, izmantojot sazarota zondes - 2.1 pg / ml (aptuveni 7 × 10 5 kopijas / ml).
[