Raksta medicīnas eksperts
Jaunas publikācijas
Sauzern-blotēšana
Pēdējā pārskatīšana: 23.04.2024
Visi iLive saturs ir medicīniski pārskatīts vai pārbaudīts, lai nodrošinātu pēc iespējas lielāku faktisko precizitāti.
Mums ir stingras iegādes vadlīnijas un tikai saikne ar cienījamiem mediju portāliem, akadēmiskām pētniecības iestādēm un, ja vien iespējams, medicīniski salīdzinošiem pārskatiem. Ņemiet vērā, ka iekavās ([1], [2] uc) esošie numuri ir klikšķi uz šīm studijām.
Ja uzskatāt, ka kāds no mūsu saturiem ir neprecīzs, novecojis vai citādi apšaubāms, lūdzu, atlasiet to un nospiediet Ctrl + Enter.
Dienvidu blotēšana (ko veica E. Souters un R. Davies 1975. Gadā) ir galvenā metode, ar kuru identificē konkrētas slimības gēnus. Šim nolūkam DNS no pacienta šūnām tiek ekstrahēts un apstrādāts ar vienu no ierobežojošajiem endonukleāzes (vai vairākiem). Iegūtie fragmenti tiek pakļauti elektroforēzei, kas ļauj tos izmērīt pēc izmēra (mazākiem fragmentiem ātrāk pārvietojas pa želejas porām). Tad fragmentus pārnest (pārpublicē) uz nitrocelulozes filtru, uz kura radioizobītie zondes ir slāņaini. Zondes saistās tikai ar papildinošo secību. Pēc tam ar autoradiogrāfijas metodi nosaka genoma DNS vēlamo fragmentu pozīciju uz elektroforēģiju.
Hibridizācija ar iezīmēto DNS zonde RNS vai DNS preparātu, drip nodara uz cietās matricu bez iepriekšējas ierobežojumiem un elektroforēzes sauc Dot un slot hibridizācija atkarībā no konfigurācijas DNS plankumi uz filtru (apaļi vai iegareni, attiecīgi).