Hematopoētiskās cilmes šūnas

Asinsrades cilmes šūnas (HSCs) kā mezenhīmas cilmes šūnu raksturo multipotency un izraisīt šūnu līnijas, ierobežotas elementiem, kas veido asins šūnas un dažas specializētas audu šūnu imūnās sistēmas.

Par esamību kopējā sencis visu asins šūnu hipotēze, kā arī terminu "cilmes šūnu", kas pieder A. Maksimovs (1909) potenciālā veidošanās šūnu masas no GSK milzīgs -. Kaulu smadzeņu cilmes šūnas ražot 10. Dienā šūnas, kas veido asinsķermenīšu perifērās pati. Esamība asinsrades cilmes šūnas tika izveidots 1961.gadā eksperimentos uz asinsradi atveseļošanās pelēm saņem letālu devu radiācijas iedarbību, kas iznīcina kaulu smadzeņu cilmes šūnas. Pos ti transplantācija singēnās kaulu smadzeņu šūnu tik nāvīgi apstaroti dzīvnieki diskrēts perēkļu asinsradi tika konstatēti liesā saņēmēju, kuru avots - vienvietīgus clonogenic cilmes šūnas.

Tika pierādīta hemopoētisko cilmes šūnu spēja pašpārbaudei, kas nodrošina hematopoēzes funkciju intogenezē. Embrionālās attīstības procesā HSC raksturo augsta migrācijas aktivitāte, kas nepieciešama to migrācijai uz hematopoētisko orgānu vietām. Šis HSC īpašums tiek saglabāts arī ontogēnā - pastāvīgas migrācijas dēļ pastāvīgi atjaunojas imūnkomponentu šūnu kopums. No GSK migrācijas, iespiešanās spēju izmantojot asins audu barjeras, implantēšana in audu augšanu un clonogenic par pamatu, kaulu smadzeņu transplantācija šūnām vairākos slimībām, kas saistītas ar slimību un asinsrades sistēmas.

Tāpat kā visas cilmes šūnu resursiem, asinsrades cilmes šūnas ir klāt savā nišā (kaulu smadzeņu), kas ir ļoti mazos daudzumos, kas ved uz zināmām grūtībām, to piešķiršanas. Immunophenotypic cilvēka HSCs raksturo kā CD34 + NK šūnu, kas spēj pārejai asinsritē un kolonijas orgānus imūnsistēmas vai repopulate kaulu smadzeņu stroma. Tas ir nepieciešams, lai skaidri saprast, ka GSK nav visvairāk nenobriedušas kaulu smadzeņu šūnas, un tiek iegūti no prekursoriem, kas ietver dormantnye fibroblastu SB34-negatīvs šūnām. Tika konstatēts, ka šūnas ar fenotipu CD34 ir iespēja iekļūt asinsritē, kur mainīt savu fenotipu CD34 +, bet reemigrācija kaulu smadzenēs reibumā mikrovides atkal kļūs CD34 negatīvs cilmes šūnu elementiem. Atmiņā CD34 šūnas nereaģē uz paracrine regulējošo stromālo signālu (augšanas faktori, citokīni). Tomēr situācijās, kas prasa pastiprinājums intensitātes asinsradi cilmes šūnas ar fenotipa CD34 reaģēt uz diferenciācijas signāliem veidotu gan asinsradi un mezenhimālo cilmes šūnas. Asinsradi veic tiešā saskarē ar GSK šūnu elementiem kaulu smadzeņu stromas iepazīstināja sarežģītu tīklu makrofāgi, reticular endotēlija šūnām, osteoblasti, stromas fibroblastus un ārpusšūnu matricē. Kaulu smadzeņu stromas ietvars - ne tikai matrica vai "skeleton" par hematopoētisko audiem, tas veic smalku regulēšanu asinsradi dēļ parakrīns regulējošo signāliem, augšanas faktoriem, citokīni un chemokines, un arī nodrošina lipīgās mijiedarbība, kas vajadzīgi veidošanos asins šūnu.

Tādējādi pastāvīgi atjaunotās hemopoēzes sistēmas pamats ir hemopoētiska cilmes šūna, kas spēj ilgstoši pašapkalpošanos. Apstrādes procesā HSC iziet primāro diferenciāciju un veido šūnu klonus, kas atšķiras ar citomorfoloģiskajām un imūnfenotipiskajām īpašībām. Pastāvīgo primitīvo un saistīto cilmes šūnu secību veido morfoloģiski identificējamas priekšteču šūnas dažādās asinsrades līnijās. No nākošo posmu kompleksa daudzpakāpju process rezultāts ir nobriešanu asinsrades šūnām un ražu nobriedušu uz perifēro asiņu izveidotas elementiem - Eritrocītu, leikocītu, limfocītu un trombocītu.

[1], [2], [3],

Hematopoētisko cilmes šūnu avoti

Asinsrades cilmes šūnas tiek uzskatīti visvairāk pētītās cilmes avotu, kas lielā mērā ir saistīts ar to lietošanu klīnikā kaulu smadzeņu transplantācija. No pirmā acu uzmetiena ir daudz zināms par šīm šūnām. Zināmā mērā tā ir taisnība, jo starpposma un nobriedušiem pēcnācēji GSK - vislētākie mobilo elementi, no kuriem katrs (eritrocītu, leikocītu, limfocītu, monocītu / makrofāgu un trombocītu) tiek rūpīgi pētīta visos līmeņos - sākot no gaismas elektronu mikroskopija, no bioķīmisko un imunofenotīpu īpašības pirms identificēšanas ar PCR analīzi. Tomēr uzraudzība, ko veic morfoloģiskā, Ultrastrukturāli, bioķīmisko, immunophenotypic un biofizikas parametriem genoma GSK nav devusi atbildes uz daudziem problēmjautājumiem, risinājums, kas ir nepieciešams, lai attīstībai šūnu transplantācijas. Tas joprojām nav izveidota GSK atrodas neaktīvā stāvoklī, tie tiek aktivizēti stabilizācijas mehānismi, ievadiet posmu simetrisku vai asimetrisku sadalījumu, un vissvarīgāk - par saistībām izglītības kā funkcionāli dažādu asins šūnu, eritrocītu, leikocītu, limfocītu un trombocītu skaits.

Ar kaulu smadzeņu šūnām ar fenotipu CD34, kas ir senči gan mezenhimâlo un asinsrades cilmes šūnu klātbūtne ir izvirzījusi jautājumu par esamību ātrāk netālu CD34 negatīvs šūnu cilmes šūnu diferenciāciju un asinsrades stromas līniju. Ilgstoša audzēšana metode tika iegūta ar tā saukto ilgtermiņa audzēšanai "ierosināšanu" šūnas (ilgtermiņa kultūra-ierosināšanu cell - LTC-IC). Šādu cilmes šūnu koloniju veidojošo aktivitāti kaulu smadzeņu stromas pamatojoties uz kombinācija augšanas faktoru kalpošanas laiks ir vairāk nekā 5 nedēļas, tā dzīvotspēju ieplānotās kolonijas veidojošo vienību skaits (CFU) in kultūrā tikai 3 nedēļas. Tā pašreiz tiek uzskatīts, ka LTC-IC - funkcionāls analogs GCW kā repopulyatsionnom ar augstu potenciālu aptuveni 20% LTC-IC raksturo fenotipu CD34 + CD38- un uzrāda augstu autonomijas spēju atjaunošanai. Atrasti cilvēka kaulu smadzeņu ar frekvenci 1:50 000. Tomēr Šādas šūnas, jāatzīst limfoidoinitsiiruyuschie-mieloīdo šūnu vistuvāk HSC kas ir iegūta apstākļos ilgtermiņa (15 nedēļas) kultūras. Šādas šūnas tiek izraudzīta kā LTC, starp cilvēka kaula smadzeņu šūnas ir atrodami 10 reizes mazāk nekā LTC-IC, un tā ir izveidota kā mieloīdo šūnu līnijās un limfoīdo asinsrades stumbra.

Kaut arī asinsrades cilmes šūnas marķēšana ar monoklonālu antivielu, kam seko identifikācijas immunophenotypic ir galvenā metode, lai identificētu un šķirošanu asinsrades cilmes šūnu ar potenciālo veltīta GSK klīnisko izmantošanu, tādējādi ierobežota. Blocking CD34 receptoru antivielas vai citas marķiera antigēnus šķirošanas immunopositive neizbēgami laikā maina īpašības šūnās, kas izolētas ar to. Vēlamā ir HSC imūnnoģenētiskā sekrēcija magnētiskajās kolonnās. Tomēr šajā gadījumā, šķirošana parasti izmanto monoklonālās antivielas, fiksētas uz metāla atbalstu. Tāpat svarīgi, gan metode GSK piešķiršanu, pamatojoties uz fenotipisko, nevis funkcionālajām īpašībām. Tāpēc daudzi pētnieki izvēlas izmantot analīzi clonogenic parametriem GSK, kas ļauj lielumu un sastāvu kolonijām, lai noteiktu gatavības pakāpi un virzienu diferenciāciju cilmes šūnām. Ir zināms, ka procesā izdarīšanas šūnu skaitu un tipu skaits kolonijās, ir samazināts. Kaulu smadzeņu cilmes šūnu un tās meita šūnu sākumā, ko sauc par "granulocītu eritrocītu monocītu-megakariotsitokolonieobrazuyuschaya vienība" (SFU-GEMM), izveidot kultūra MULTILINEAR lielas kolonijas, kas satur, attiecīgi, granulocītu, eritrocītus, monocītu un megakariocītu. Kas atrodas zem line granulocītu-lineage saistības monotsitokolonieobrazuyuschaya vienības (SFU-GM) ģenerē kolonijas granulocītu un makrofāgu, un granulocitāras kolonijas veidojošas vienības (SFU-G) - tikai mazu koloniju nobriedušu granulocītu. Early eritrocīts priekštece - burstoobrazuyuschaya vienības sarkano asins šūnu (SFU-E) - ir avots lielu un vairāk nobriedušu sarkano asins šūnu koloniju veidojošās vienības (SFU-E) - mazo sarkano asins šūnu kolonijām. Ar iedzīvotāju ar šūnu augšanu puscietām medijos var identificēt šūnas veido sešu veidu mieloīdām koloniju: SFU-GEMM, GM-SFU, SFU-G, M-SFU, VFU-E un E-SFU).

Tomēr, papildus hematopoētiskajiem atvasinājumiem, jebkura izejmateriāla izdalīšanai HSC satur ievērojamu skaitu vienlaicīgu šūnu. Šajā sakarā ir nepieciešama transplantāta iepriekšēja attīrīšana, pirmkārt, no donora imūnās sistēmas aktīvām šūnām. Parasti tiek izmantota imūnsistēma, kuras pamatā ir specifisku antigēnu limfocītu ekspresija, kas ļauj izdalīt un noņemt, izmantojot monoklonālas antivielas. Turklāt, paņēmiens immunorozetochnaya T-limfocītu vājināta kaulu smadzeņu transplantācija, kas balstās uz veidošanos kompleksiem CD4 + limfocītu un īpašas monoklonālās antivielas efektīvi izvadīt ar aferēze. Šī metode nodrošina attīrītu šūnu materiālu ar 40-60% hematopoētisko cilmes šūnu.

Palielinot skaitu cilmes šūnu dēļ, lai aizvāktu nobriedušu asins šūnu no leikaferēzes produktu tiek panākts ar pretplūsmas centrifugējot, kam seko filtrējot (klātbūtnē ar antidotu - trinātrija citrāta) caur kolonnu, kas satur neilona šķiedras, kas pārklāti ar cilvēka imūnglobulīnu. Secīga izmantošana šīm divām metodēm nodrošina pilnīgu attīrīšanu no transplantātu no trombocītiem par 89% - no eritrocītu un par 91% - no leikocītu. Sakarā ar ievērojamu HSC zudumu samazināšanos, CD34 + šūnu līmeni kopējā šūnu masā var palielināt līdz 50%.

Izolētu hematopoētisko cilmes šūnu funkcionālajām īpašībām tiek izmantota spēja radīt nobriedušo asins elementu kolonijas kultūrā. Izveidoto kolonnu analīze ļauj identificēt un kvantitatīvi noteikt cilmes šūnu veidus, to izdarīšanas pakāpi un noteikt to diferenciācijas virzienu. Clonogenic aktivitāte tiek noteikta bieza masa mediju, metilcelulozes, agars, plazmas vai fibrīna želejas, šūnu migrāciju aktivitāti samazinātu, novērstu to stiprinājumiem uz virsmas stikla vai plastmasas. Optimālā kultivēšanas apstākļos klonu veidošanās no vienas šūnas attīstās 7-18 dienu laikā. Ja klonā ir mazāk nekā 50 šūnas, to identificē kā vienu kopu, ja šūnu skaits pārsniedz 50 - kā koloniju. Tiek ņemts vērā šūnu skaits, kas spēj veidot koloniju (kolonijas veidojošās vienības - CFU vai kolonijas veidojošās šūnas - KOP). Jāatzīmē, ka parametri un CFU COC neatbilst skaitam HSC ar šūnu suspensijas, lai gan tas korelē ar to vēlreiz uzsver nepieciešamību identificēt funkcionālo (koloniju veidojošo) aktivitāti HSCs in vitro.

Starp kaulu smadzeņu šūnām ir visaugstākais proliferācijas potenciāls, jo lielākās kolonijas veidojas kultūrā. Ar šādu koloniju skaitu tiek ierosināts netieši noteikt cilmes šūnu skaitu. Pēc veidošanos koloniju vitro pārsniedz 0,5 mm diametrā un ar šūnu skaits 1000, autori ir pārbaudītas stabilitāti šo šūnu subletāliem devas 5-fluoruracilu, un pārbauda savas spējas repopulate kaulu smadzenes nāvīgi apstarotu dzīvniekiem. Saskaņā ar šiem parametriem izolētās šūnas daudz neatšķīrās no HSC un saņēma saīsinājuma simbolu HPP-CFC - kolonijas veidojošās šūnas ar augstu proliferācijas potenciālu.

Turpina meklēt iespēju kvalitatīvākam asinsrades cilmes šūnu selekcijai. Tomēr asinsrades cilmes šūnas ir morfoloģiski līdzīgas limfocītu un ir salīdzinoši vienveidīga kolekcija šūnu ar gandrīz apaļas kodolu, hromatīna un daļiņu slabobazofilnoy nelielu citoplazmā. Precīzu skaitu ir grūti noteikt. Tiek pieņemts, ka GSK cilvēka kaulu smadzenēs notiek ar biežumu 1 uz 106 kodola saturošām šūnām.

Hematopoētisko cilmes šūnu identifikācija

Lai uzlabotu identifikāciju asinsrades cilmes šūnas tiek veikta secīgi vai vienlaicīgi (uz daudzkanālu sorbitāna tere) pētniecības membrannosvyazannyh spektrā antigēnu, kurā GSK fenotips CD34 + CD38 būtu apvienojumā ar to, ka nav diferenciācijas marķieriem lineāra, jo īpaši antigēnu imūnkompetentajām šūnu, piemēram, CD4, un virsmas imūnglobulīnu glikohorīns.

Faktiski visās hematopoētisko cilmes šūnu fenotipēšanas shēmās ir noteikts CD34 antigēns. Šis glikoproteīns, ar kura molekulārā masa ir aptuveni 110 kDa, kas veic vairākas glikozilēšanas izteiktas uz plazmas šūnu membrānu pēc aktivēšanas gēna lokalizētas uz hromosomas 1. CD34 molekulas funkcija ir saistīta ar L-selektinoposredovannym mijiedarbību priekšlaicīgas asinsrades cilmes šūnu no kaula smadzeņu stromas pamata. Tomēr jāatceras, ka klātbūtne CD34 antigēna uz šūnu virsmas ļauj tikai veikt iepriekšēju novērtējumu satura GSK šūnu suspensijas, kā tas ir izteikts, un citiem asinsrades cilmes šūnas un kaulu smadzeņu stromas šūnu un endotēlija šūnām.

Veicot hematopoētisko cilmes šūnu diferenciāciju, CD34 ekspresija tiek pastāvīgi samazināta. Eritrocīti, granulocīti un monocītu lietotās progenitoru šūnas vai nu vāji pauž antigēnu CD34, vai arī vispār vispār nav (fenotips CD34). Uz kaulaudu un nobriedušu asins šūnu diferencētu šūnu virsmas membrānas nav konstatēts CD34 antigēns.

Jāatzīmē, ka dinamikā diferenciāciju asinsrades cilmes šūnu ne tikai samazina ekspresijas līmeni, kas CD34, bet paralēli pakāpeniski palielināta izpausmi CD38 antigēnu - neatņemama membrānas glikoproteīnu ar no 46 kDa, kam NAD-glikogidrolaznoy un ADP-ribosyl cyclase aktivitāti molekulmasu, kas liecina tās iesaistīšanu ADP-ribozes transportēšanā un sintēšanā. Līdz ar to ir iespējams dubultot pārbaudei pakāpi saistību asinsrades cilmes šūnu. Populācija šūnām ar fenotipu CD34 + CD38 +, no 90 līdz 99% CD34 pozitīvu kaulu smadzeņu šūnu ietver cilmes šūnas, kam ir ierobežoti proliferatīvu potenciālo un diferenciāciju, tā kā ar fenotipu CD34 + CD38 šūnas var pieprasīt lomu GSK.

Tiešām, populācija kaulu smadzeņu šūnu, ar formulu CD34 + CD38- aprakstīts, satur relatīvi lielu skaitu primitīvām cilmes šūnu, kas spēj atšķirt vērā mieloīdo un limfoīdo līnijām. Saistībā ar ilgtermiņa audzēšanai ar fenotipu CD34 + CD38- šūnu izdodas iegūt visus nobriedušas asins šūnas: neitrofilo, eozinofīlo, bazofīlo, monocītu, megakariocītu, eritrocītus un limfocītiem.

Salīdzinoši nesen tā konstatēja, ka CD34 pozitīvu šūnu izteikt vēl divi marķieri - AC133 un CD90 (Thy-1), kas tiek izmantoti arī, lai noteiktu asinsradi cilmes šūnas. Thy-1 antigēns ir co-izteikts ar receptoru CD117 (c-kit) par CD34 + šūnas kaulu smadzenēs, smadzeņu un perifēro asiņu. Tas ir virsmas fosfatidilinozītolu saistošais glikoproteīns ar molekulmasu 25-35 kDa, kas piedalās šūnu adhēzijas procesos. Daži autori uzskata, ka Thy-1 antigēns ir visvairāk nenobriedušo CD34 pozitīvo šūnu marķieris. Pašreklāmas šūnas ar fenotipu CD34 + Thy-1 + rada ilgi kultivētas līnijas ar meža šūnu veidošanos. Tiek ieteikts, ka Thy-1 antigēns bloķē normatīvus signālus, kas izraisa šūnu dalīšanu. Neskatoties uz to, ka CD34 + TU1 + šūnas ir spējīga pašatjaunošanās un radīšanu ilgtermiņa kultivētām līnijām, to fenotips nevar attiekties tikai uz VDK, kā Thy-1 + saturs kopējā svara CD34 pozitīvu šūnu elementiem ir aptuveni 50%, ievērojami pārsniedzot hematopoētisko šūnu skaits.

Daudzsološāks hematopoētisko cilmes šūnu identificēšanai ir AC133, hematopoētisko progenitoru šūnu antigēna marķieris, kura izpausmi vispirms tika atklāts embrija aknu šūnās. AC133 ir transmembrānais glikoproteīns, kas parādās šūnu membrānas virsmā agrākajos GSK nogatavināšanas posmos - iespējams, ka tas ir pat agrāk nekā antigēnu CD34. Pētījumos A. Petrenko un V. Grishchenko (2003) tika konstatēts, ka AC133 izpaužas līdz 30% embrionālo aknu CD34 pozitīvo šūnu.

Tādējādi, ideāls fenotipa profils asinsrades cilmes šūnas, ko šodien koncepcijas, summa šūnu kontūras, ķēdēs, kas ir klāt CD34 antigēnu konfigurācijas, AC133 un Thy-1, bet tur nav vietas molekulārā prognozes CD38, HLA-DR un marķieri lineārā diferenciācija GPA , CD3, CD4, CD8, CD10, CD14, CD16, CD19, CD20.

GSK fenotipiskie variācija portrait var būt no CD34 + CD45RalowCD71low kombinācija, jo īpašības ar šo formulu, kas aprakstīta šūnas nav atšķiras no funkcionāliem parametriem šūnu ar fenotipu CD34 + CD38. Turklāt, cilvēka HSC var identificēt ar fenotipa pazīmes CD34 + Thy-l + CD38Iow / 'c-kit / zema - tikai 30 no šīm šūnām pilnīgi atjaunot asinsradi nāvīgi apstarotas pelēm.

No analīzes vispārējiem fenotips kaulu smadzeņu šūnu faktiski sākās 40 gadu intensīva pētniecība GSK vienlaicīgi spēj gan pašatjaunošanās un diferenciācijas citiem mobilajiem elementiem, kas ļauj pamatot izmantot kaulu smadzeņu transplantācijas, lai ārstētu dažādas patoloģijas no asinsrades sistēmu. Nesen atklātie jaunie cilmes šūnu veidi vēl nav plaši izmantoti klīniskajā praksē. Tomēr cilmes šūnas no nabas saites (vads) asinīm un augļa aknās var ievērojami paplašināt šūnu transplantācija ne tikai hematoloģijā, bet arī citās jomās medicīnas, kā atšķiras no HSC kaulu smadzenēm kā kvantitatīvus darbības rezultātu un kvalitātes īpašībām.

Dzinēja asinsrades cilmes šūnu masa, kas nepieciešama, lai transplantācijas parasti tiek iegūti no kaulu smadzeņu, perifēro un saites asins, kā arī embrija aknām. Turklāt, asinsrades cilmes šūnas var iegūt ar in vitro pavairošanas ESC un to turpmākā diferencēšana uz asinsradi mērķtiecīgu mobilo elementiem. A. Petrenko, V. Grishchenko (2003) pamatoti norādīt būtiskas atšķirības imunoloģiskās īpašības un spēja atjaunot asinsradi GSK atšķirīgu izcelsmi, pateicoties nevienlīdzīgai attiecība ietverto to avotus polipotentas sākumā un vēlāk pieļāva cilmes šūnu. Turklāt, no dažādiem cilmes avotiem iegūtas asinsvadus cilmes šūnas, kvantitatīvi un kvalitatīvi ir pilnīgi dažādas nehemopoētisko šūnu asociācijas.

Tradicionāls hematopoētisko cilmes šūnu avots ir kaulu smadzenes. Kaulu smadzeņu šūnu suspensiju iegūst no vēdera kaula vai krūšu kaula, izskalošanās vietējās anestēzijas laikā. Šādi iegūtā suspensija ir neviendabīga un satur HSC maisījumu, stromālo šūnu elementus, mieloīdu un limfomu līniju priekštecēju šūnas, kā arī nobriedušus asins elementus. Šūnu skaits ar fenotipiem CD34 + un CD34 + CD38 starp kaulaudu mononukleārajām šūnām ir attiecīgi no 0,5 līdz 3,6 un attiecīgi no 0,5 līdz 0,5%. Perifērās asinis pēc G-CSF izraisītas HSC mobilizēšanas satur 0,4-1,6% CD34 + un 0-0,4% no CD34 + CD38.

Lielāks šūnu daļa, CD34 + CD38 immunophenotype un CD34 + nabas saites asins - un 0-0.6 OD-2.6%, un to maksimālā skaita ir konstatēta starp hematopoētiskām augļa aknu šūnās - un 2,3 0,2-12,5 -35,8%, attiecīgi.

Tomēr transplantāta materiāla kvalitāte ir atkarīga ne tikai, kas ietverta tajā no CD34 + šūnu daudzuma, bet arī uz to funkcionālo aktivitāti, ko var novērtēt ar līmeni koloniju veidošanos in vivo (smadzeņu atkalapdzīvināšana nāvīgi apstarotas dzīvniekiem) un in vitro - augšanas koloniju puscietām nesēju . Tika konstatēts, ka koloniju veidojošo un proliferatīvā aktivitāte asinsrades cilmes šūnu ar fenotipu CD34 + CD38 HLA-DR, izolēts no augļa aknām, augļa kaulu smadzenēs un saites asins, un ievērojami pārsniedz proliferatīva jaudu hematopoētiskām koloniju veidojošo šūnām kaulu smadzenēs un perifēro asiņu pieaugušo. Kvantitatīvā un kvalitatīvā analīze GSK dažādas izcelsmes atklāja būtiskas atšķirības to relatīvo saturu šūnu suspensijas, un funkcionalitāti. Maksimālais skaits CD34 + šūnas (24,6%), ko novēro transplantāta materiāli, kas iegūti no augļa kaulu smadzenēs. Pieaugušā cilvēka kaulu smadzenēs ir 2,1% CD34 pozitīvo šūnu elementu. Starp mononukleāriem no cilvēka pieaugušo perifērām asinīm tikai 0,5% ir fenotips CD34 +, turpretim nabas saites asiņu to daudzums sasniedz 2%. Tādējādi koloniju veidojošo spēju CD34 + šūnas augļa kaulu smadzenēs ar 2,7 reizes pārsniedz jaudu klonu pieauguma hematopoētisko kaulu smadzenēs pieaugušu cilvēka šūnu un nabassaites asins šūnu forma ievērojami lielāku kolonijas nekā hematopoētiskām elementiem, kas izdalīti no perifērām asinīm pieaugušo: 65,5 līdz 40 un , 8 kolonijas / 105 šūnas, attiecīgi.

Atšķirības proliferatīvo aktivitāti un koloniju veidošanas spējas uz asinsrades cilmes šūnas ir saistītas ne tikai ar atšķirīgu termiņu, bet arī ar savu dabisko mikrovidi. Ir zināms, ka intensitāte izplatīšanu un diferenciāciju cilmes šūnu ātrums nosaka integrālo regulatīvo ietekmi uz augšanas faktoriem un citokīniem daudzkomponentu sistēma, kas ražo gan cilmes šūnu un šūnu elementu matrici stromas mikrovidi. Izmantojot attīrītus šūnu populācijas un brīvus plašsaziņas līdzekļus serumā ar nolūku šūnu kultūru, kurā raksturīgs izaugsmes faktoriem, kas ir stimulējošu un inhibē cilmes šūnu dažādos līmeņos, cilmes šūnu un šūnu no izdarīti konkrētā lineārā virzienā. Veikto pētījumu rezultāti pārliecinoši liecina, ka GSK, kas iegūts no avotiem ar dažādiem ontogenētiskas attīstības līmeņiem, atšķiras gan fenotipiski, gan funkcionāli. Attiecībā uz GSK, paliekot agrīnās ontogēnijas stadijās, kam raksturīgs liels reprodukcijas potenciāls un augsta proliferatīvā aktivitāte. Šādas šūnas atšķiras ar garāku telomēra garumu un tiek pakļauti visu hematopoētisko šūnu veidošanos veidošanai. Imūnās sistēmas reakcija uz HSC embriju izcelsmi aizkavējas, jo šādas šūnas maigi izpauž HLA molekulas. Ir skaidrs gradācija relatīvā satura HSCs un viņu spēju pašiem atjaunot un līniju skaits, tie veido veidu saistībām: CD34 + šūnas augļa aknas> CD34 + šūnas no nabassaites asiņu> CD34 + šūnas no kaulu smadzenēm. Ir svarīgi, ka šādas atšķirības nav unikāla iekšējai un neo postanatalnomu agrīno periodu cilvēka attīstībā, bet arī visā attīstību savstarpēji - proliferatīvu un HSCs koloniju veidojošo darbību iegūtas no kaulu smadzenēs vai perifērajās asinīs pieaugušajiem, apgriezti proporcionāls vecumam donora.