Imūnhistoķīmiskie marķieri mutes gļotādas pirmsvēža bojājumu un lūpu sarkanās robežas diagnostikā

Savlaicīga un efektīva mutes gļotādas (CRS) un sarkano lūpu krāsu (CCG) neoplastisku bojājumu diagnostika joprojām ir nopietna oncostomatoloģiskā problēma. Mutes dobuma švamozā šūnu karcinoma aizņem sesto vietu pasaulē, kas sastopama visās lokalizācijas ļaundabīgo audzēju vidū. Krievijas Federācijā mutes dobuma ļaundabīgo audzēju biežums ir 2-4% no cilvēka ļaundabīgo audzēju kopskaita.

Pēdējo gadu laikā mutāciju gļotādas slimību struktūra ir ievērojami mainījusies, proti, pirmsvēža slimību skaita palielināšanās. Šajā ziņā efektīvs neinvazīvs ļaundabīgu audzēju pazīmju noteikšana joprojām ir neatliekams zobārstniecības uzdevums.

Neskatoties uz šķietamo vienkāršību klīnisko attēlveidošanas prognozēšanu izmaiņām mutes gļotādu un CGC saistībā ar ārējo lokalizāciju, noteikšanas nosological precancer, pamatojoties tikai uz iespaidu, ko pārbauda un palpē, bieži vien noved pie diagnostikas kļūdas, ir dažādas pakāpes keratinizācijas vai čūlām pat markornyh elementu sakāvi padara tos grūti atšķirt. Īpaši grūti agrīni diagnosticēt ļaundabīgo audzēju, jo parādās tās klīniskie simptomi nedaudz vēlāk notikšanas ļaundabīgu transformāciju.

Tādējādi V.P. Kharchenko et al Ir pierādīts, ka vairāk nekā 2/3 pacientu terapijas laikā medicīnas iestādē un diagnostikas izveidē ir slimības III-IV stadijas. Viens no ārstēšanas beigu iemesliem ir klīniskā attēla "izplūšana" slimības sākuma stadijās. Bez tam ir pierādīta nepieciešamība veikt organizatorisku un metodisku darbu un paaugstināt zobārstu zināšanu līmeni par mutes gļotādas pirmsvēža slimību agrīnajām klīniskajām izpausmēm. Veiktie pētījumi parādīja, ka tikai 42,8% no dentists izmanto diferencētu mutes vēža agrīnas izpausmes, 4,2% respondentu var pareizi veikt primāros diagnostikas pasākumus šīs lokalizācijas vēža noteikšanai.

Pēc dažādu autoru datiem dzirdēto perorālo gļotādas vēža formu procentuālais daudzums diagnozes kļūdu dēļ ir 58,4-70%. Situāciju sarežģī problēmas, kas nav atrisinātas pirmsdzemdību klīniskajā diagnozē, jo īpaši grūtības atšķirt ļaundabīgu audzēju rašanos, kā arī problēma, izvēloties metodi pirmsvēža slimību ārstēšanai. Biopsijai nav absolūtu un relatīvu norādījumu, īpaši konservatīvas ārstēšanas stadijās. Līdz šim literatūrā nav neviena klīniskā līmeņa diagnostikas kritērija, ko zobārsts varētu atsaukties, izvēloties piemērotu metodi konkrētas pirmsvēža slimības ārstēšanai.

Diagnostikas grūtību izšķiršana lielākajā daļā autori redzama palīgdiagnostikas metodēs (citoloģijā, cheilometomātiskās skalā, biomikroskopijā, optiskās koherences tomogrāfijā). Tomēr šīs metodes ir diezgan subjektīvas, jo tām ir tikai kvalitatīvu izmaiņu aprakstošs raksturs skarto audu sastāvā. Viens no veidiem, kā kvantificēt morfoloģiskās izmaiņas, ir noteikt imūnhistoķīmiskos marķierus.

Modernās morfoloģiskās audzēju pārbaudes metožu ieviešana mūsdienās ir ievērojami uzlabojusi ļaundabīgo audzēju diagnostikas un ārstēšanas kvalitāti. Metodiskās iespējas mūsdienu molekulārās onkoloģijā paplašinātai pašlaik izmanto imūnhistoķīmiskiem pētījumiem var noteikt ne tikai histoloģisko diagnozi audzēja, bet arī, lai dotu tai morfofunkcionālo īpatnības attiecībā uz agresivitāti un prognozes attiecībā uz pirmsvēža bojājumu un vēža jau attīstījusies.

Saskaņā ar mūsdienu idejām, šūnu ļaundabīgas transformācijas bāze ir vienas vai vairāku šūnu onkogēnu vai supresoru gēnu aktivācija. Tas tiek novērots 30% cilvēku vēža vēža, un daudzos gadījumos to var noteikt ar imunohistochemiski. Tika pētīti Oncogenes ras p21, HER2 / neu, bcl-2 un supresoru gēni p53 un Rb dažādos audzējos. Daži no uzskaitītajiem onkogēniem (un supresoru gēniem) ir neatkarīgas prognostiskās un prognozes pazīmes.

Mutes dobuma gļotādas epitēlija ir vēža audzēju veidošanās locus praedifectionis. Ārējie faktori (traumatiskie oklūzija vietnes, asas malas restaurācijai maksātnespējīgu ortopēdisko dizaina neloģiskas individuāla mutes higiēna, pretiekaisuma un destruktīva periodonta bojājumi), kopā ar ģenētiskiem (iedzimtu) faktori var būt loma, izraisot vēzi šo lokalizāciju. Attīstībā plakanšūnu karcinomu mutes dobuma gļotādas trauma, var būt iesaistīta mehānismiem kontroles procesu epitēlija hiperplāzijas un plakanšūnu metaplāziju.

Morfoloģiskās pazīmes mutes dobuma gļotādas epitēlija ļaundabīgu audzēju, kas saistīts ar izmaiņām kopumu diferenciācijas (fenotipa citokeratīna galvenokārt epitēlija slāņa) laikā marķieri CEA izteiksmi, kā arī proliferācijas marķieri Ki - 67.

P53 - audzējs gēns - slāpētājs olbaltumvielu produkts, kas ir kodolenerģijas transkripcijas faktors, ar daudzām funkcijām, ieskaitot bloķēt pagājušo šūnas uz šūnu ciklu un apoptozes ierosināšanu. P53 proteīns ir izteikts visās ķermeņa šūnās. Ja ģenētiskais aparāts nav bojāts, p53 proteīns atrodas neaktīvā stāvoklī, un, radot DNS bojājumus, tiek aktivizēta DNS. Activation sastāv iegūt spēju saistīties ar DNS un aktivizētu transkripciju gēnu, kas satur regulējošu rajons ir nukleotīdu sekvenci, kas ir izraudzīta p53-atbildes elementam. Mutācijas p53 šūnās notiek aptuveni 50% no vēža, izraisa proteīnu sintēzi ar tās funkciju zudumu, bet ar augstu stabilitāti un uzkrājot kodolā, kas immunohistochemically izteikta atsevišķu kodolenerģijas krāsošanu.

Savukārt wt-53 oncosupresoru gēna un savdabīgās p53 proteīna "savvaļas" tips ir galvenā loma apoptozes attīstībā. Ja DNS ir bojāts, parādās wt53 gēns un attiecīgais proteīns. Pēdējie bloķē šūnu cikla in G1-S fāzē, un tādējādi kavēt turpmāku replikāciju bojāto DNS, kas tiek sintezēts S fāzē, un rada apstākļus, lai atdalītu bojātās zonas un remonta tā modificēta porciju. Ja notiek atlīdzināšana, šūna turpina sadalīt un dot veselu šūnu veidošanos. Tomēr, ja kompensācija nenotiek, tad tiek iekļauti citi mehānismi, kas nodrošina šādas šūnas iznīcināšanu ar bojātu (mutagēnu) DNS, i. E. Attīstās šūnu nāves ģenētiskā programma - apoptoze.
Pēdējos gados ir ierosināts, ka p53 statuss var būt izšķirošs faktors, kas nosaka audzēja jutību pret ķīmijas un staru terapiju. Apstiprinājums par šo hipotēzi ir daudzi pētījumi rāda, ka mutācijas p53 ir faktors sliktu prognozi un neefektīva adjuvantu terapiju ar dažādiem audzējiem mutes gļotādu.

Proliferācijas marķieri arī ir ļoti informatīvi diagnosticējoši, lai prognozētu ļaundabīgo audzēju gaitu. Proliferatīvā aktivitāte ir vadošais faktors gan šūnu ļaundabīgas transformācijas mehānismā, gan jau izveidojušos audzēju bioloģiskajā uzvedībā. Daudzsološs proliferatīvās aktivitātes marķieris ir Ki-67 antigēns, kas izpaužas praktiski visos šūnu cikla posmos un attiecīgi atspoguļo proliferatīvo baseinu lielumu. Ki-67 kodējošais gēns atrodas uz 10 hromosomas garās rokas. Ki-67 attiecas uz regulējošiem proteīniem. Tās izskats sakrīt ar šūnas iekļūšanu mitozē, kas ļauj to izmantot kā universālu proliferācijas marku ļaundabīgo audzēju augšanas novērtēšanā.

Vairāki pētījumi par diagnostikas vērtību imūnhistoķīmiskiem marķieri, lai prognozētu plūsmu pirmsvēža bojājumu, mutes gļotādas un cinobrs robežas. Murti PR et al. Pētīja p53 izpausmi ar sarkanu vienotas likmes SSRI. Kad tika noteikta imūnhistoķīmiskā metode, p53 izpausme neizdevās atklāt mutes gļotādas priekšdziedzera ļaundabīgo stāvokli. Autori norādīja, ka Pārmērīga p53 maksimuma laikā tuvu laiku pārejai uz pirmsvēža vēzis, un to nevar izmantot kā sākuma marķieri ļaundabīga audzēja prognozes precancer mutes gļotādu. Citi pētnieki konstatēja, ka cilvēka gēns TP53 kodē vismaz 9 dažādas izoformas. Cits p53 ģimenes loceklis, p63, ietver sešas dažādas izoformas un ir galvenā loma iekšķīgo gļotu, siekalu dziedzeru, zobu un ādas attīstībā. Tika ieteikts, ka p63 saistās ar galvas un kakla plakanšūnu karcinomas attīstību. Tomēr, salīdzinot ar nemodificētiem audiem, statistiski nozīmīgas izmaiņas p53 un p63 jauno izoformu izpausmē SSRI priekšvēlēšanā netika novērotas. De Sousa FA pētījumi apstiprināja p53 markera prognostisko nozīmi, nosakot mutes gļotādas priekšdziedzera ļaundabīgo transformāciju. Tajā pašā laikā daži autori uzskata, ka p53 nevar izmantot kā vienu marķieri, lai prognozētu vēža attīstību.

Tikpat daudzsološa prognostiskā Imūnhistoķīmiskajai plakne ir pārstāvēta pētīta audu paraugu podoplanina - neatņemama membrāna mucoprotein izteikts kā nemainītā un grozītā iekaisuma un neoplastiskas endotēlija no limfātisko kapilāru. Pētnieki bija atradis statistiski nozīmīga saistība izteiksmi podoplanina iABCG2 (ATP saistošu proteīnu apakšgrupā G2) ar risku ļaundabīgu transformāciju par lichen planus (risks bija ievērojami lielāks ar coexpression podoplanina un ABCG2, nekā bez coexpression podoplanina un ABCG2), un secināja, ka podoplanin un ABCG2 var tikt izmantoti kā biomarķieri riska noteikšanai, ļaundabīgu transformāciju ar pirmsvēža bojājumu RBCU

Ārvalstu zinātnieku pētījumi apstiprināja Fas / FasL izteiksmes diagnostisko nozīmi kā vēža attīstības biomarkerus. Fas ir I tipa transmembrānu glikoproteīns (sinonīmi APO-I, CD95), un inducē apoptozi šūnu pēc mijiedarbības ar Fas-ligandu (FasL) vai agresīvu monoklonālās antivielas pret fas.

Tajā pašā laikā ir zināms, ka Fas tiek izteikts gandrīz visos audu veidos. Paaugstināta Fas izteiksme tiek novērota nierēs, aknās, sirdī un aizkrūts dziedzeros. Turklāt šis receptors ir izteikts daudzos audzējos, kā arī vīrusu inficētās šūnas. Dažādu šūnu tipu izturības pret Fas atkarīgu apoptozi iemesls var palielināt šo šūnu šķīstošo Fas veidošanos. Šķīstošie Fas ir alternatīvas savienošanas produkts un spēj inhibēt apoptozi, ko izraisa agoniskas monoklonālas antivielas pret Fas vai FasL.

Tādējādi neskaidrs interpretācija pētījumu rezultātiem, kuri veikti dažādu autoru noved pie secinājuma, ka šajā posmā molekulāro onkoloģijas izmantotu imūnhistoķīmiskas marķieri perspektīvi kombinācijā ar citām metodēm, diagnozi un prognozi pirmsvēža bojājumi mutes gļotādu.

Īpaša nozīme ir imūnhistoķīmisko marķieru klasifikācijas diagnosticēšanai nozīme. Mēs uzskatām, ka, samazinot nozīmi, tās var sakārtot šādā secībā:

1. Augstas diagnostiskās nozīmes imūnhistoķīmiskie marķieri: subplanīns, ABCG2, bcl-2;
2. Imūnhistoķīmiskie marķieri ar vidējo diagnostiskās nozīmes pakāpi: Bax, MMP-9;
3. Daudzsološi imūnhistoķīmiskie marķieri, kuru diagnosticējošais nozīmīgums prasa turpmākus pētījumus: MMP-2, MT1-MMP, Fas / FasL;
4. Imūnhistoķīmiskie marķieri, kuru diagnosticētais nozīmīgums priekšlaicīgu slimību gaitas prognozēšanai nav pierādīts: p53, p63.

Pamatojoties uz šo analīzi, literatūras datiem, var secināt, ka noteikšana imūnhistoķīmiskiem marķieru nevajadzētu uzskatīt par vienīgo metodi prognozēt kursu pirmsvēža stadijas mutes gļotādu un identificējot risku ļaundabīgu transformāciju, bet, tomēr, metode ir augsts diagnostikas vērtība kombinācijā ar citiem pirmsvēža slimību gaitas prognozēšanas metodes.

Vecākā pētniece Kuzņecova Roza Gilevna. Imūnhistoķīmiskie marķieri mutes gļotādas priekšlaicīgu bojājumu diagnostikā un lūpu sarkanā robeža // Praktiskā medicīna. 8 (64) 2012. Gada decembris / 1. Sējums

[1], [2], [3], [4], [5]