Ģenētiski modificētas imūnās šūnas parāda potenciālu novērst orgānu atgrūšanu

Žurnālā “Frontiers in Immunology” tika prezentēta principiāla šūnu terapija, kas var “atbruņot” pacientus ar augstu imūnsensibilizāciju pirms orgānu transplantācijas. Zinātnieki inženierijas ceļā izveidoja regulatorās T šūnas (Treg) ar himērisku anti-HLA antivielu receptoru (CHAR) — būtībā ar HLA-A2 proteīna “ēsmu”, kas ieslēdz Treg šūnas, nonākot saskarē ar B šūnām, kas ražo anti-HLA-A2 antivielas. In vitro šīs CHAR-Treg šūnas atpazina un nomāca augstas afinitātes IgG veidošanos pacientiem ar iepriekšēju sensibilizāciju, vienlaikus saglabājot Treg šūnu “identitāti” (FOXP3/HELIOS) un nenogalinot mērķa šūnas. Tas sniedz iespēju mērķtiecīgai desensibilizācijai bez pilnīgas imūnsupresijas.

Pētījuma pamatojums

Transplantoloģijā galvenais “interešu konflikts” ir antivielas pret donora HLA antigēniem. Pēc transfūzijām, grūtniecībām vai iepriekšējām transplantācijām recipientam bieži attīstās sensibilizācija: asinīs jau cirkulē anti-HLA IgG un B šūnu atmiņas antivielas, kas ir gatavas ātri “atklāties”. Šādi pacienti ir mazāk saderīgi, ilgāk gaida orgānu un tiem ir lielāks akūtas un hroniskas antivielu atgrūšanas risks. Standarta desensibilizācijas protokoli (plazmaferēze/imūnadsorbcija, lielas IVIG devas, rituksimabs, proteasomu inhibitori, imlifidāze) darbojas plaši un aptuveni: tie samazina kopējo antivielu vai šūnu kopumu, bet nav vērsti uz specifiskiem “bīstamiem” kloniem, un tos pavada toksicitātes un infekcijas riski.

Imūnsistēmai ir sava "bremze" - regulatorās T šūnas (Treg), kas uztur toleranci pret "svešām". Pēdējos gados Treg terapija ir kļuvusi par reālu klīnisku stratēģiju, taču "noklusējuma" versijā tā ir neselektīva: injicētās šūnas neatšķir, pret kuru antigēnu attīstās reakcija. Tāpēc pētnieki cenšas "pieskrūvēt mērķi" - aprīkot Treg šūnas ar mākslīgiem receptoriem, kas tiek iedarbināti tikai tad, kad tie sastopas ar pareizo signālu. Tā radās ideja par himēriskiem receptoriem (pēc būtības līdzīgi CAR tehnoloģijām), bet tie tiek salikti nevis uz anti-CD19 bāzes, bet gan no pašu HLA molekulu domēniem, lai Treg šūnas tiktu aktivizētas B šūnu tuvumā, kas ražo atbilstošās anti-HLA antivielas.

Šādu "mērķtiecīgu" Treg šūnu kritiskās prasības ir divējādas. Pirmkārt, tiem jāpaliek īstiem Treg šūnām (jāuztur FOXP3/HELIOS un supresoru programmas), nepārvēršoties efektora fenotipā spēcīgas stimulācijas fonā. Otrkārt, to darbībai jābūt mērķtiecīgai: precīzi nomācot allospecificus B klonus un plazmablastus, minimāli traucējot pārējo imūnsistēmu, lai nepaaugstinātu ārstēšanas izmaksas infekciju un audzēju risku gadījumā. Ja šī problēma tiks atrisināta, parādīsies metode maigai, precīzai desensibilizācijai pirms transplantācijas un pilnīgas imūnsupresijas nepieciešamības samazināšanai pēc tās.

Visbeidzot, praktisks konteksts: dažiem pacientiem sensibilizācija ir vērsta pret vienu vai diviem “problemātiskiem” alēļiem (piemēram, HLA-A2), un tieši tie bloķē piekļuvi orgāniem. Šūnu terapija, kas vērsta uz šādiem “sašaurinājumiem”, var paplašināt saderīgu donoru loku, paātrināt transplantāciju un samazināt antivielu atgrūšanas biežumu, īpaši bērniem un recipientiem ar ilgstošu “vēsturisku” kontaktu ar svešu HLA (vairākas transfūzijas, atkārtotas transplantācijas). Tāpēc anti-HLA izraisītu Treg šūnu principa pierādījums ir svarīgs solis ceļā uz personalizētu imunomodulāciju transplantoloģijā.

Kā jaunā šūna ir strukturēta

• Konstrukcija: HLA-A2 ekstracelulārais domēns + eņģes CD8 + transmembrānas CD28 + signalizācijas "tandēms" CD28-CD3ζ. Šis receptors tiek aktivizēts, kad uz B šūnas virsmas atrodas anti-HLA-A2 antiviela.
• Specifiskums: CHAR-Treg “iesākas” specifiski uz anti-A2 B šūnām, neietekmējot citas imunitātes sistēmas.
• Drošs Treg profils: pēc aktivizēšanas tie nezaudē līniju marķierus (FOXP3, HELIOS), t.i., tie paliek kā “bremzes” un nepārvēršas par “gāzi”.
• Necitotoksisks: atšķirībā no modificētām parastajām CD4 T šūnām ar to pašu receptoru, CHAR-Treg nenogalina anti-A2 šūnas, bet nomāc to funkciju.

Kas tieši tika pārbaudīts?

• Ex vivo pacientu modelis: HLA-A2 presensibilizētu pacientu asins mononukleārās šūnas tika stimulētas ar stimuliem (HLA-A2-K562), pēc tam pievienotas CHAR-Treg un mērītas IgG (ELISA) un B šūnu sastāvs (spektrālās plūsmas citometrija, UMAP).
• Rezultāts: pēc 48 stundām un 5 dienām IgG ražošana bija ievērojami samazināta (2 no 3 pacientu paraugiem), B šūnu īpatsvars kopumā samazinājās bez acīmredzamas “izvēles” starp apakštipiem (naivās, atmiņas, marginālās zonas, plazmablastu).
• Autoru interpretācija: Testa jutīgumu var palielināt, veicot anti-A2 specifisku ELISA un atsevišķu IgG klašu novērtēšanu; nepieciešama testēšana lielākam pacientu skaitam un citu HLA alēļu (piemēram, A24) noteikšanai.

Kāpēc tas ir svarīgi transplantācijai?

Mūsdienās 20 % primāro un līdz pat 75 % atkārtoto recipientu jau ir anti-HLA antivielas, kas ievērojami sašaurina piemērotu donoru loku un veicina lielu imūnsupresijas devu nepieciešamību. Neselektīvie desensibilizācijas protokoli (plazmaferēze, B šūnu “nullināšanās”) nedarbojas vienmērīgi un ir pilni ar komplikācijām – sākot no infekcijām līdz nefro- un neirotoksicitātei (īpaši bērniem). Mērķtiecīgi Treg šūnas, kas iedarbojas tikai pret “bīstamiem” B kloniem, teorētiski ļauj paplašināt piekļuvi orgāniem un samazināt kopējo toksicitāti pēc transplantācijas.

• Galvenās iespējamās priekšrocības:
  • Pirms transplantācijas: “noņemiet” sensibilizāciju pret noteiktu HLA un padariet pacientu salīdzināmu ar nesensitizētu pacientu.
  • Pēc transplantācijas: samazināt pamata imūnsupresijas devas un hroniskas antivielu atgrūšanas risku.
  • Papildus transplantācijai: šai pieejai ir potenciāls pielietojums HCV ārstēšanā un pat spontānā aborta gadījumos, kad mātei attīstās antivielas pret tēva HLA.

Ko saka paši autori un preses ziņojumi

MUSC komanda (ASV) šo darbu sauc par “pirmo soli mērķtiecīgas imūnsupresijas virzienā: tieši to B šūnu nomākšana, kas apdraud transplantāciju, vienlaikus atstājot pārējo imūnsistēmu mierā.” Paziņojumā uzsvērts potenciāls samazināt blakusparādības un “radīt vienlīdzīgus spēles noteikumus” tiem, kuriem pašlaik transplantācija ir gandrīz neiespējama smagas sensibilizācijas dēļ.

Kur ir robežas un kas tālāk?

• Šis ir in vitro/ex vivo principa pierādījums, kas veikts ar nelielu skaitu pacientu paraugu: par klīniku vēl ir pāragri runāt. Ir nepieciešami pirmie cilvēku pētījumi, dažādu HLA validācija un padziļināta mehānisma izpēte (sekretētie faktori, kontaktatkarīga supresija, CHAR-Treg transkriptomika).
• Ir svarīgi izstrādāt specifiku un drošību: pārliecināties, ka nomākšana ir stingri vērsta pret antigēniem un netraucē citas imunitātes nozares.

Kas jāatceras

• Ar HLA-A2 "ēsmu" konstruētas trega šūnas atpazīst un nomāc B šūnas, kas ir bīstamas transplantācijai.
• In vitro tie samazina IgG veidošanos sensibilizētiem pacientiem un saglabā Treg fenotipa stabilitāti bez citotoksicitātes.
• Šī ir mērķtiecīga alternatīva neselektīvai desensibilizācijai, ar potenciālu samazināt imūnsupresijas devas un paplašināt piekļuvi transplantātiem. Nākamais solis ir klīniskie pētījumi.

Avots: Valentín-Quiroga J. et al. Ar himēriskām anti-HLA antivielu receptoru inženierijas palīdzību veidotas cilvēka regulatorās T šūnas nomāc alloantigēniem specifiskas B šūnas no iepriekš sensibilizētiem transplantācijas recipientiem. Frontiers in Immunology, publicēts 2025. gada 15. augustā. DOI: 10.3389/fimmu.2025.1601385