Gripas vīruss

Gripas A vīruss ir virions, kura sfēriskā forma ir 80-120 nm diametrs, tās molekulmasa ir 250 MD. Vīrusa genomu pārstāv vienlopu fragmenti (8 fragmenti) ar negatīvu RNS ar kopējo masu 5 MD. Kodolekokapsīda simetrijas veids ir spirāle. Gripas vīrusu ir superkapsid (membrānu), kas satur divas glikoproteīnu - hemaglutinīns un neiraminidāze, kas izvirzās virs membrānas formā dažādu kniedes. Hemaglutinīnam ir trimera struktūra ar masu 225 kD; m katram 75 kD monomēram. Monomēru veido mazāks subvienots ar masu 25 kD (HA2) un lielāku subvienību ar masu 50 kD (HA1).

Galvenās hemaglutinīna funkcijas:

• atzīst šūnu receptoru - mukopeptidu, kuram ir N-acetilneurams - jauna (sāļu) skābe;
• nodrošina viriona membrānas sapludināšanu ar šūnu membrānu un tās lizosomu membrānām, ti, tā ir atbildīga par viriona iekļūšanu šūnā;
• nosaka vīrusa pandēmijas raksturu (hemaglutinīna mainīšana - pandēmijas cēlonis, tās mainīgums - gripas epidēmijas);
• ir vislielākās aizsargierīces, kas ir atbildīgas par imunitātes veidošanos.

In cilvēka A gripas vīrusiem, zīdītāju un putnu atrasts 13 dažādu veidu hemaglutinīna antigēna, kas ir secīgi numurētas (otN1doN13), kas piešķirta.

Neuraminidāze (N) ir tetramere ar masu 200-250 kD, katram monomēram ir masa 50-60 kD. Tās funkcijas ir šādas:

• virionu izplatīšanās nodrošināšana neuramīna skābes atdalīšanai no nesen sintezētiem virioniem un šūnu membrānām;
• kopā ar hemaglutinīnu nosaka vīrusa pandēmijas un epidēmiskās īpašības.

A gripas vīruss atklāja 10 dažādus neuraminidāzes variantus (N1-N10).

Viriona nukleokapsīds sastāv no 8 vRNS fragmentiem un kapīdu proteīniem, kas veido spirāles virkni. Visu 8 vRNS fragmentu 3 'galos ir identiskas 12 nukleotīdu sekvences. Katra fragmenta 5 'galiem ir arī tāda pati 13 nukleotīdu secība. 5 'un 3' gali ir daļēji savstarpēji papildinoši. Šis apstāklis, protams, ļauj regulēt fragmentu transkripciju un replicēšanu. Katrs fragments tiek transkribēts un atkārtots patstāvīgi. Ar katru no tiem četri kapsīda proteīni ir cieši saistīti: nukleoproteīns (NP), tas pilda strukturālu un regulējošu lomu; olbaltumviela PB1 - transkriptāze; PB2 - endonukleāze un RA - replicase. Olbaltumvielām PB1 un PB2 ir bāziskās (sārma) īpašības un PA - skābes īpašības. Olbaltumvielas PB1, PB2 un PA veido polimēru. Ar nukleokapsīdas ieskauj matricas proteīns (M1 proteīnu), kas spēlē vadošo lomu viriona morfoģenēzes un aizsargā viriona RNS. M2 proteīni (kodē vienu no lasīšanas rāmji 7. Fragments), NS1 un NS2 (vRNA kodēta astoto fragments, kas ir, kā septītajā fragments vRNA divi lasīšanas kadri) tiek sintezēta gaitā vīrusa replikācijas, bet tās struktūra nav iekļauts.

[1], [2], [3], [4]

A gripas vīrusa dzīves cikls

Gripas vīruss tiek absorbēts šūnu membrānā sakarā ar hemaglutinīna un mukopeptida mijiedarbību. Tad vīruss iekļūst šūnā, izmantojot vienu no diviem mehānismiem:

• viriona membrānas saplūšana ar šūnu membrānu vai
• gar ceļu bārkstis fovea - robežojas veziklu - endosoma - lizosoma - virsskaņas membrānas saplūšana ar lizosomu membrānu - nukleokapsīda iznākums šūnas citolā.

Otrais posms "viršanas" izdalīšanā (matricas proteīna iznīcināšana) notiek ceļā uz kodolu. Gripas vīrusa dzīves cikla īpatnība ir tā, ka tās vRNS transkripcija prasa sēklas. Tas, ka vīruss nevar sintezēt pats "cap", vai vāciņu (angļu vāciņu.) - īpaša vieta uz 5'-beigām mRNS, kas sastāv no denaturēto guanīna un 10 līdz 13 blakus esošiem nukleotīdiem, kas ir nepieciešams, lai atpazītu mRNA ribosomu. Tāpēc tas caur tās PB2 proteīna kodumi vāciņu no šūnu mRNS, kā arī mRNS sintēzi šūnās notiek tikai kodolā, vīrusu RNS ir obligāti iekļūt vispirms uz kodolu. Tas iekļūst tajā formā ribonucleoprotein, kas sastāv no 8 RNS fragmentus, kas saistīti proteīniem NP, PB1, PB2 un PA. Tagad šūnas dzīve ir pilnībā pakļauta vīrusa, tā reprodukciju interesēm.

Transkripcijas iezīme

VRNS kodolā tiek sintezēti trīs veidu vīrusu specifiskās RNS: 1) pozitīvas komplementārās RNS (mRNAs), ko izmanto kā vīrusu proteīnu sintēzes matricas; tie satur 5 'galu, kas tiek noņemta no šūnu mRNS 5' gala, un 3 'galā ir poli-A secība; 2) pilna garuma papildu RNS (kRNS), kas kalpo kā paraugs virionu RNS sintēzei (vRNAs); pie kRNS 5'-gala nav redzama vāciņa, 3. 'beigās nav poli-A secības; 3) negatīva viriona RNS (vRNA), kas ir nesen sintezētu virionu genoms.

Tūlīt, pat pirms sintēzes pabeigšanas, vRNS un kRNS nonāk kopā ar kapīdu proteīniem, kas ieiet kodolā no citozola. Tomēr virionos ir iekļauti tikai ribonukleoproteīni, kas saistīti ar vRNS. Ribonukleoproteīni, kas satur cRNA, ne tikai neietilpst virionu sastāvā, bet pat neatstāj šūnas kodolu. Vīrusu mRNS ievadi citosolā, kur tie tiek tulkoti. Nesen sintezētās vRNS molekulas pēc asociācijas ar kapīdu proteīniem migrē no kodola uz citolītu.

[5], [6], [7], [8], [9]

Vīrusu proteīnu tulkošanas īpatnības

Proteīni NP, PB1, PB2, RA un M tiek sintezēti uz brīvām poliribosomām. Olbaltumvielas NP, PB1, PB2 un PA sintēze pēc atgriešanās no citosolā uz kodolu, kur viņi saistīties ar tikko sintezēti vRNA, un pēc tam atgriezās kā nukleokapsīdu stāšanās citosolā. Matricas proteīns pēc sintezācijas pārvietojas uz šūnu membrānas iekšējo virsmu, no tā novadot šai zonā šūnu proteīnus. H un N olbaltumvielas tiek sintezēti uz ribosomas, kas saistītas ar membrānu endoplazmiskajā retikulā, par to transportēt, pakļautas glikozilācijas, un uzstādīts uz ārējās virsmas šūnu membrānas, kas veido tapas tieši pretī M proteīna, kas atrodas uz tās iekšējās virsmas. Apstrādes gaitā proteīns H tiek apstrādāts, sagriežot HA1 un HA2.

Pēdējā viriona morfogēnā stadija tiek kontrolēta ar M-proteīnu. Nukleokapsīds ar to mijiedarbojas; tā iet caur šūnas membrānu, tas ir pārklāts ar pirmo M-proteīnu, un pēc tam šūnu lipīdu slāni un superkapsidnymi glikoproteīniem H un N. Dzīves cikla no vīrusa ņem 6-8 stundas un ir pilns budding no jauna sintezēto virion, kas spēj uzbrukt šūnas citos audos.

Vīrusa stabilitāte ārējā vidē ir zema. To viegli iznīcina, sildot (5-10 minūtes 56 oC temperatūrā) saules gaismas un UV starojuma ietekmē un viegli dezinficējot.

[10], [11], [12], [13], [14], [15], [16]

Patogēniskais stāvoklis un A gripas simptomi

Gripas inkubācijas periods ir īss - 1-2 dienas. Vīruss atkārtojumu in epitēlija šūnu gļotādas elpceļu vispirms lokalizētu in trahejas, kas klīniski izpaužas kā sausā klepus ar agonisku Sāpīgām trahejas. Slāpēto šūnu degradācijas produkti nonāk asinsritē, izraisa nopietnas intoksikācijas un ķermeņa temperatūras paaugstināšanos līdz 38-39 ° C. Palielināts asinsvadu caurlaidība bojājums izraisa endotēlija šūnas var izraisīt patoloģiskas izmaiņas dažādos orgānos: DOT asinsizplūdumus trahejā, bronhos, un dažreiz smadzeņu tūska fatāla. Gripas vīruss ir nomācošs efekts uz asinīm un imūnsistēmu. Tas viss var izraisīt sekundāro vīrusu un baktēriju infekcijas, kas sarežģī slimības gaitu.

Postinfekciozā imunitāte

Iepriekšējā ideja, ka pēc tam, kad ciešanas gripu joprojām ir vāja un īslaicīgs imunitāte pēc atgriešanās noliegta H1N1 vīruss 1977. Vīruss izraisa slimību, galvenokārt cilvēkiem ar 20 gadiem, kas ir. E. Tie, kuri nav slimi viņi izmanto, lai, pirms 1957. Tādēļ, pēc infekcijas imunitāte ir pietiekami intensīva un ilgstoša, bet ir izteikta tipa specifiska.

Galvenā loma iegūtās imunitātes veidošanā pieder vīrusu neitralizējošām antivielām, kas bloķē hemaglutinīnu un neuraminidāzi, kā arī IgA sekrējošos imūnglobulīnus.

A gripas epidemioloģija

Infekcijas avots ir persona, slimība vai pārvadātājs, reti dzīvnieki (mājas un savvaļas putni, cūkas). Cilvēku infekcija notiek ar gaisā esošām pilieniņām, inkubācijas periods ir ļoti īss (1-2 dienas), tāpēc epidēmija izplatās ļoti ātri, un, ja trūkst kolektīvas imunitātes, tā var kļūt par pandēmiju. Imunitāte ir galvenais gripas epidēmiju regulators. Kopējā imunitāte palielinās, un epidēmija samazinās. Tajā pašā laikā imunitātes veidošanās dēļ tiek izvēlēti vīrusa celmi ar modificētu antigēnu struktūru, galvenokārt hemaglutinīnu un neuraminidāzi; šie vīrusi turpina izraisīt uzliesmojumus, līdz viņiem parādās antivielas. Šāds antigēns dreifē un uztur epidēmijas nepārtrauktību. Tomēr A vīrusa gripā ir atklāta cita veida mainīgums, ko sauc par maiņu vai bīdes. Tas ir saistīts ar pilnīgu viena tipa hemaglutinīna (retāk - un neuraminidāzes) maiņu uz citu.

Visu gripas pandēmiju izraisīja A tipa gripas vīrusi, kuriem tika veikta šviltoze. 1918 pandēmijas izraisīja H1N1 vīrusu fenotipa (nogalināti aptuveni 20 miljoni cilvēku) pandēmijas 1957. Gadā - H3N2 vīruss (slims ar vairāk nekā pusi no pasaules iedzīvotājiem), 1968 - H3N2 vīruss.

Lai izskaidrotu iemeslus asu izmaiņām A tipa vīrusu tipos, ir ierosinātas divas galvenās hipotēzes. Saskaņā ar hipotēzes AA Smorodintsev, vīrusu epidēmija ir izsmēlusi savas iespējas, nepazūd, bet turpina cirkulēt grupā bez būtiskām uzliesmojumu vai ilgi saglabājas cilvēka organismā. 10-20 gadu laikā, kad radīsies jaunas paaudzes cilvēki, kam nav imunitātes pret šo vīrusu, tas kļūst par jaunu epidēmiju cēloni. Par labu šai hipotēzei ir tas, ka gripas vīruss ar H1N1 fenotipu, pazuda 1957. Gadā, kad tā aizstāja vīrusu H3N2, atkal parādījās pēc 20 gadu prombūtnes 1977. Gadā

Saskaņā ar citu hipotēzi, izstrādājusi un atbalsta daudzi autori, jauniem veidiem, gripas vīruss ir saistīts ar atkārtoti asociāciju genomu starp vīrusu cilvēka gripas un putnu starp putnu gripas vīrusa vidū gripas vīrusi putnu un zīdītāju (cūkas), kas saņem atbalstu no segmentu struktūru vīrusa genoma (8 gabalu )

Tādējādi A gripas vīrusam ir divi veidi, kā mainīt genomu.

Punktu mutācijas, kas izraisa antigēnu novirzi. Pirmkārt, hemaglutinīna un neuraminidāzes gēni, īpaši H3N2 vīrusa gēnos, ir uzņēmīgi pret tām. Pateicoties tam, H3N2 vīruss 1987.-1998. Gadā izraisīja 8 epidēmijas un līdz šim joprojām ir epidēmija.

Gēnu saikne starp cilvēku gripas vīrusiem un putnu un cūku gripas vīrusiem. Tiek uzskatīts, ka gripas vīrusu genomu reaassocionācija ar putnu un cūku gripas vīrusa genomiem ir galvenais šā vīrusa pandēmijas variantu rašanās iemesls. Antigēna drift ļauj vīrusi pārvarēt esošo imunitāti cilvēkiem. Antigēna pārmaiņa rada jaunu epidēmijas situāciju: lielākajai daļai cilvēku nav imunitātes pret jaunu vīrusu un rodas gripas pandēmija. Eksperimentāli ir pierādīta šāda gripas vīrusa genomu reassociācijas iespēja.

Ir konstatēts, ka cilvēka gripas epidēmijas izraisa A tipa vīrusi ar tikai 3 vai 4 fenotipiem: H1N1 (H0N1); h3N2; H3N2.

Tomēr vistas (putnu) vīruss ir arī ievērojams drauds cilvēkiem. Putnu gripas uzliesmojumi, vairākkārt novērots, īpaši vistas H5N1 vīruss ir radījis miljonu epizootiskai starp mājas un savvaļas putniem no 80 līdz 90% mirstību. Cilvēki ieguva inficēšanos no cāļiem; 1997. Gadā no vistām tika inficēti 18 cilvēki, no kuriem trešā daļa nomira. Īpaši liels uzliesmojums tika novērots 2004.gada janvārī-martā Tā aptvēra gandrīz visas valstis Dienvidaustrumu Āzijā un viens no ASV štatiem, un radīja milzīgus ekonomiskos zaudējumus. 22 cāļi tika inficēti un nogalināti. Stingra karantīna izvadīšana no visiem putniem iedzīvotāju visās centros, hospitalizācijas un izolācija pacientu, un visi cilvēki ar drudzi, kā arī personas, kas bija saskarē ar pacientiem, aizliegt mājputnu gaļas importu no tām: lai uzliesmojuma likvidēšanas tika ņemti vissmagākās un izšķirošie pasākumi virs valstīm, stingri medicīniski un veterinārā uzraudzībā visiem pasažieriem un transportlīdzekļiem, kas ierodas no šīm valstīm. Plaša gripas izplatīšanos starp cilvēkiem nav noticis, jo nebija atkārtoti asociācija genoma ar putnu gripas vīrusu ar cilvēka gripas vīrusa genoma. Tomēr šādas apvienošanās draudi joprojām ir reāli. Tas var izraisīt jaunas bīstamas cilvēku gripas pandēmijas vīrusa rašanos.

In nosaukumu konstatēto gripas vīrusu celmu norādīt vīrusa serotips (A, B, C), īpašnieks formā (ja tas nav cilvēks), vieta no izolācijas, celma numurs, gads no tās izlaišanas (pēdējie 2 cipari) un fenotips (iekavās). Piemēram: "A / Singapūra / 1/57 (h3N2), A / Duck / PSRS / 695/76 (H3N2)".

[17], [18], [19], [20], [21],

A gripas laboratorijas diagnostika

Pētījuma materiāls kalpo kā noņemams nazofarneks, ko iegūst vai nu ar skalošanu, vai izmantojot kokvilnas tamponus un asinis. Diagnostikas metodēm ir šādas:

• Viroloģiski - cāļu embriju infekcija, zaļo pērtiķu (Vero) un suņu (MDSK) nieru šūnu kultūras. Šūnu kultūras ir īpaši efektīvas A (H3N2) un B vīrusu izolēšanai.
• Seroloģisks - specifisku antivielu noteikšana un to titra palielināšanās (pāra serumā) ar RTGA, RSK palīdzību, imūnanalīzes metodi.
• Kā paātrināta diagnoze tiek izmantota imunofluorescences metode, kas ļauj ātri identificēt vīrusa antigēnu nosūkuma izdrukās no deguna gļotādas vai mazgāšanas no pacientu nazofaringes.
• Lai noteiktu un identificētu vīrusu (vīrusu antigēni), ierosinātās metodes RNS zondei un PCR.

A gripas ārstēšana

Ārstēšana gripas A, kas būtu jāuzsāk pēc iespējas ātrāk, kā arī gripas profilaksei un citu vīrusu ARI ir balstīta uz izmantošanu dibazola, interferona un tās ierosinātāji amiksina un Arbidol par speciālām shēmām, un ārstēšanai un gripas profilaksei bērniem, kas vecāki par 1 gadu - Alguire (rimantadīna ) ar īpašām shēmām.

Specifiska A gripas profilakse

Katru gadu pasaulē simptomi miljoniem cilvēku cieš no gripas, kas rada milzīgu kaitējumu iedzīvotāju veselībai un katras valsts ekonomikai. Vienīgais drošais līdzeklis cīņai pret to ir kolektīvās imunitātes radīšana. Šim nolūkam ir piedāvāti un izmantoti šādi vakcīnu veidi:

1. dzīvo no novājinātā vīrusa;
2. nogalināti visu virionu;
3. Subviriona vakcīna (no sadalītajiem virioniem);
4. subvienības vakcīna, kas satur tikai hemaglutinīnu un neuraminidāzi.

Mūsu valstī ir izveidota un attiecas polimēra-trīsvērtīgo subvienību vakcīnu ( "Grippol"), kurā konjugāts ir sterils virsmas proteīnus A un B vīrusi ir saistīta ar kopolimēra polioksidoniem (imūnsistēmas).

Bērni no 6 mēnešiem. Līdz 12 gadiem, saskaņā ar PVO ieteikumiem, vakcinētu tikai subvienības vakcīnu kā vismazāk reakojošu un toksisku.

Galvenā problēma, paaugstinot gripas vakcīnu efektivitāti, ir nodrošināt to specifiskumu pret faktisko vīrusu, tas ir, vīrusa versiju, kas izraisīja epidēmiju. Citiem vārdiem sakot, vakcīnai jāietver specifiski antigēni no faktiskā vīrusa. Galvenais veids, kā uzlabot vakcīnas kvalitāti, ir izmantot visvairāk konservētos un kopējos vīrusa visu antigēnu variantos epitopus, kuriem ir maksimāla imunogenitāte.