Konfokāla mikroskopija

Konfocāla mikroskopija šobrīd tiek uzskatīta par vienu no daudzsološākajām ādas vizuālās uztveršanas metodēm in vivo, un tāpēc interese par to gan ārstiem, gan zinātniskās pētniecības institūtu pārstāvjiem ir neparasti liela.

[1], [2], [3], [4]

Konfocāla mikroskopijas iespējas

Dermatoloģijā konfoka lāzera mikroskopiju izmanto:

• pētīt savienojumu iekļūšanu ādā (penetrācijas ceļi, kinētika, izplatīšanās ādā);
• dziedzeru novērošana (aktīva un pasīva stāvokļa definīcija);
• mikrocirkulācijas gultas pētījumi (arī reālā laikā);
• jaunveidojumu diagnostika.

Neapspriežot iepriekšminēto konfokālas mikroskopijas šķirņu priekšrocības un trūkumus, mēs atzīmējam, ka pēdējos gados popularitāte ir guvusi fluorescences lāzera confocal mikroskopiju.

[5], [6], [7],

Konfocāla mikroskopija ādas izmeklēšanai

Confocal mikroskopija piedāvā divus vērtīgus iespējas - studiju audu šūnu līmenī kādā stāvoklī fizioloģisko dzīvi un demonstrējumi pētījumu rezultātiem (ti, šūnu aktivitāte ..) četrās dimensijās - augstums, platums, dziļums un laika. Lai uzlabotu attēla kvalitāti un izpētes dziļumu, vissvarīgākā loma ir audu spējai pārraidīt gaismu, citiem vārdiem sakot, tās pārredzamību. Konfocālas mikroskopijas metode ir bezkontakta, gaismas starmeņi nerada kaitējumu vai diskomfortu pacientam vai eksperimentālam dzīvniekam.

Lai pētītu ādu, tiek izmantota loka mikroskopijas konfigurācijas skala (CSLM). Metode ļauj redzēt epidermu un papilāru dermas slāni ar izšķirtspēju, kas ir tuvu histoloģiskajam. Visi aptaujas rezultāti tiek parādīti uz monitora un saglabāti kā attēlu failu paketi (mikrofilmas formā (dinamikā) vai mikrofotogrāfos).

Ir divu veidu metodes:

• Atstarojošais (refleksijas CSLM) pamatā ir fakts, ka dažādām intracelulārām un starpšūnu struktūrām ir atšķirīgs gaismas refrakcijas indekss, kas ļauj iegūt kontrasta attēlu.
• Fluorescence (fluorescences CSLM) - izmanto lāzera gaismu, kas iesūcas ādā un tajā aizrauj exo- vai endochromophores, kas, atbildot, sāk izstaro fotonus (t.i., fluorescē).

Sānu izšķirtspēja ir minimālais attālums starp punktiem, kas atrodas horizontālajā plaknē, t.i. Plakne, kas ir paralēla ādas virsmai. Aksiālā izšķirtspēja ir minimālais attālums starp punktiem, kas atrodas plaknē, kas ir perpendikulāra ādas virsmai.

[8], [9], [10], [11], [12], [13], [14], [15]

Konfocālas mikroskopijas vēsture

Ideja izveidot mikroskopu, kas spēj pārveidot šūnu līmenī, lai parādītu dzīvu audu iekšējo izgriezumu, tika aktīvi attīstīts pirms 130 gadiem. Mūsdienu mikroskopu galvenais elements tika izstrādāts XIX gs. Beigās un bija rotējošs disks ar mazākajām spirālveida atverēm. Šo disku 1883. Gadā izgudroja Vācijas students Paul Nipkov, par godu kuru saņēma viņa vārdu - Nipkov disku (vai nipkov disku). Izgudrojums balstījās uz gaismas spēju, kas iet caur mazākajiem caurumiem diskā un palielinošo lēcu, iekļūst audu dziļumā un izgaismo šūnas fragmentu attālumā no virsmas. Kad disks griežas ātri, fragmenti tiek pievienoti kopējam attēlam. Noņemot vai tuvinot struktūru objektam, var analizēt audu optiskās daļas dziļumu.

Deviņdesmito gadu sākumā tikai ar VTR ierīču parādīšanos 1980. Gados un datoriem, kas spēj apstrādāt attēlus, radās reāla iespēja radīt un efektīvi pielietot tos modernos mikroskopus, kas mūsdienās tiek izmantoti.